Методика предназначена для оценки микробиологического поражения смазочно-охлаждающих технологических средств на водной основе аэробной микрофлорой.
2.3.5 - трифенилтетразолий хлористый (ТТХ) по ПРТУ 6-09-5328-68, (Шосткинский завод химреактивов);
термостат, обеспечивающий поддержание постоянной температуры ЗО±5 °С;
шкаф сушильный лабораторный по ГОСТ 19491-74;
пробирки стеклянные по ГОСТ 10515-63, диаметром 16 и 20 мм , высотой 150, 200 мм;
пипетки стеклянные градуированные вместимостью 1, 2, 5 и 10 мл по ГОСТ 12487-67;
цилиндры мерные по ГОСТ 1770-74 вместимостью 100 мм;
вода дистилированная по ГОСТ 6709-72;
весы аналитические типа АД-200 или аналогичные 2 класса точности.
Подготовка к испытанию:
Приготавливают 0,5%-ный раствор 2.3.5 - трифенилтетразолий хлористый. Для этого 0,5 г ТТХ взвешивают с точностью до 0,01 г, помещают в мерный цилиндр вместимостью 100 мл и доводят объём дистиллированной водой до метки. Для растворения ТТХ цилиндр с содержимым энергично взбалтывают.
В вымытые, высушенные в сушильном шкафу (при 160 °С в течение 6-8 ч) пробирки наливают 9 мл 0,5%-ного раствора ТТХ и добавляют 1 мл эмульсии подлежащей испытанию (общее количество жидкости в пробирках составляет 10 мл).
Содержимое пробирок тщательно перемешивают.
Приготовленные таким образом образцы помещают в термостат при температуре 30±5 °С и выдерживают в течение 12-24 ч.
В основу метода положено определение дегидрогеназной активности микрофлоры, обитающей в СОТС, при помощи индикатора 2.3.5 — тетразолий хлорида (ТТХ).
Окисленная форма ТТХ бесцветна, восстановленная форма тетразолия, называемая формазаном, приобретает ярко-красный цвет. Восстановление ТТХ в формазан происходит при помощи дегидрогеназ микроорганизмов. Поэтому при микробиологическом поражении эмульсии содержимое в пробирках приобретает красную окраску, интенсивность которой зависит от количества микроорганизмов в системе.
Эмульсия, свободная от бактерий, после 24 ч инкубирования с ТТХ, сохраняет свой первоначальный цвет. Слабому микробиологическому поражению соответствует точечное или незначительное окрашивание в виде пятна (обычно на дне пробирки) или кольца.
Чем больше количество бактерий в системе, тем ярче её окраска и тем скорее она проявится. При очень сильном микробиологическом поражении, когда эмульсия СОТС практически испорчена, ярко-красная окраска всей эмульсии в пробирке появляется уже через 1-2 ч после внесения ТТХ.
Поэтому установлено 5 баллов окраски испытуемых образцов, которые отличаются друг от друга или по количеству окрашенного материала, или по интенсивности окраски. Каждому баллу окрашивания соответствует определённое количество бактерий в эмульсии.
Зависимость окраски образцов эмульсии от количества микроорганизмов
|
Характер и интенсивность окрашивания эмульсии с добавлением ТТХ |
Балл |
Количество бактерий, клеток/мм2 |
|
Цвет эмульсии не изменился |
0 |
0 |
|
Незначительное окрашивание в виде пятна или кольца |
1 |
0-103 |
|
Ярко-красная окраска в виде пятна (на дне пробирки) |
2 |
103-105 |
|
Розовая окраска всей эмульсии в пробирке |
3 |
105-107 |
|
Ярко-красная окраска всей эмульсии в пробирке |
4 |
108 и более |
При микробопоражении, соответствующем 0-1 баллам, эмульсия жизнеспособна; 2-3 - эмульсия подлежит корректировке; 4 - эмульсия полностью поражена и подлежит замене.
Руководствуясь данными, представленными в таблице, можно определить степень микробиологического поражения СОТС, установить время ввода в систему биоцида и его количество, определить время замены СОТС.
Литература:
"Эксплуатационные свойства водосмешиваемых СОТС" / Дубровский Ю.С., Румянцева Т.А., Чугай Г.Н. – Киев, 1991 г.- с. 55-57.
"Методики контроля и корректировок рабочих эмульсий (растворов) смазочно- охлаждающих технологических средств" . – Пермь, 2000г. - с.16-18.
Метод основан на свойстве чугуна реагировать с коррозионно-активными рабочими смазочно-охлаждающими технологическими средствами, образуя окрашенные продукты коррозии.
весы лабораторные общего назначения по ГОСТ 24104-88 2-го класса точности;
чашка стеклянная лабораторная по ГОСТ 10973-75 диаметром 100 мм (чашка Петри);
две пипетки вместимостью 1 или 2 мл по ГОСТ 20292-74;
стружка из чугуна СЧ 18-36 или СЧ 21-40 по 1 ОС Г 1412- 70 следующих размеров:
- длина в развёрнутом виде 3-7 мм,
- ширина 2-5 мм, толщина 0,4-0,5 мм;
бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 2026-76;
шпатель из коррозионностойкого материала по ГОСТ 9147-78.
Подготовка к испытанию:
Проводят визуальный осмотр стружки на отсутствие коррозии, не прикасаясь к ней руками.Срок хранения стружки не должен превышать 2-3-х недель после её изготовления.
На круглый бумажный фильтр диаметром 50 мм, помещённый в чашку Петри, с помощью шпателя равномерно наносят 2±0,1 г чугунных стружек. Мерной пипеткой отбирают 2 мл хорошо перемешанной рабочей эмульсии и равномерно смачивают стружку на фильтре.
Чашку Петри закрывают крышкой и выдерживают при комнатной температуре в течении 2 ч. При этом чашка Петри не должна подвергаться воздействию сквозняков и солнечных лучей.
Затем стружку удаляют, круглый бумажный фильтр просушивают при комнатной температуре. Испытания проводят параллельно в двух чашках Петри.
|
0 |
1 |
2 |
3 |
4 |
|
|
|
|
|
|
Рабочая эмульсия или водный раствор СОТС считается выдержавшим испытание, если на фильтровальной бумаге полностью отсутствуют коррозионные пятна. В случае наличия коррозионных пятен оценивают степень коррозии по следующей схеме.
Схема оценки степени коррозии:
|
Балл |
Степень коррозии |
Внешний вид фильтра |
|
0 |
Отсутствие |
Без изменений |
|
1 |
Следы |
До трех пятен диаметром менее 1 мм |
|
2 |
Легкая |
Пятна с диаметром более 1 мм |
|
3 |
Умеренная |
Рис. 1, схема 3 |
|
4 |
Сильная |
Рис. 1, схема 4 |
Результаты параллельных определений (степень коррозии в баллах) не должны отличаться более чем на одну степень коррозии. За результат испытаний принимается большая степень коррозии.
Литература:
"Эксплуатационные свойства водосмешиваемых СОТС" / Дубровский Ю.С., Румянцева Т.А., Чугай Г.Н. –Киев, 1991 г.- с. 49-51.
"Методики контроля и корректировок рабочих эмульсий (растворов) смазочно-охлаждающих технологических средств" . – Пермь, 2000г. – с.10-12.
Подготовка эмульсии для испытаний:
Испытания проводятся при концентрации эмульсии заданной техническими условиями на соответствующий концентрат СОЖ.
Испытания производятся с использованием жесткой воды, приготовленной по следующей методике:
Воду общей жесткостью 4,6 мг-экв/дм3 готовят путем растворения в 1 дм3 дистиллированной воды по ГОСТ 6709 81,5 мг безводного хлористого кальция по ГОСТ 450 и 394,4 мг 7-водного сернокислого магния по ГОСТ 4523.
Например, для получения 3%-ной эмульсии смешивают 3 мм3 концентрата СОЖ и 97 мм3 жесткой воды. После 30 минутной выдержки эмульсия готова для последующих анализов.
Отбор пробы для анализа производится пипеткой из среднего слоя после отстаивания эмульсии в течение 10 минут.
Определение коррозионой агрессивностиОпределение производят по ГОСТ 6243 (раздел 2.1) со следующими дополнениями:
для проведения указанного испытания применяют эмульсию, приготовленную как указано выше;
при проведении испытаний используется чугун СЧ20 по ГОСТ 1412.
Метод основан на прямопропорциональной зависимости показателя преломления водных растворов и эмульсий СОЖ от процентного содержания концентрата.
рефрактометр типа с пределами показателя преломления 1,2-1,7;
весы лабораторные общего назначения по ГОСТ 24104-88 2-го класса точности;
палочка стеклянная;
вата гигроскопическая;
спирт этиловый синтетический по ГОСТ 18300-87.
Взвешивают на лабораторных весах 1, 2, 3, 4, 6, 8, 10 и 15 г концентрата СОТС с точностью ±0,01 г.
В каждый образец доливают воду, применяемую для разбавления концентратов СОТС на предприятии, до общей массы 100 г, т. е. соответственно 99, 98 ,97, 96, 94, 92, 90 и 85 г.
Полученные стандартные эмульсии СОЖ тщательно перемешивают и выдерживают 30 минут при комнатной температуре.
Определяют показатель преломления полученных эмульсий СОЖ и строят калибровочный график, откладывая по оси ординат показатель преломления, а по оси абсцисс - концентрацию эмульсии 1, 2, 3, 4, 6, 8, 10 и 15% соответственно.
Проведение испытания:
Стеклянной палочкой наносят каплю рабочей эмульсии на входную грань измерительной призмы, установленной в строго горизонтальном положении.
Затем прижимают каплю осветлительной призмой так, чтобы между гранями обеих призм остался очень тонкий (0,1- 0,2 мм) слой жидкости, и вращением шкалы подводят границу светотени к центру перекрестия сетки.
Записывают полученное значение показателя преломления и повторяют определение. Перед каждым измерением грани призм рефрактометра протирают ватой, смоченной в спирте.
По найденному показателю преломления с помощью калибровочного графика определяют процентное содержание концентрата в рабочей эмульсии.
Измерение повторяют не менее двух раз.
Среднее арифметическое значение измерений соответствует показателю концентрации рабочей эмульсии СОТС.
отбор пробы для анализа производится пипеткой из среднего слоя после отстаивания эмульсии в течение 10 минут.
для повышения точности определения концентрации калибровочный график "показатель преломления - концентрация эмульсии " рекомендуется строить для каждой партии СОЖ, поступившей на предприятие.
"Методики контроля и корректировок рабочих эмульсий (растворов) смазочно-охлаждающих технологических средств" . – Пермь, 2000 г. - с. 7-8.
"Эксплуатационные свойства водосмешиваемых СОТС" / Дубровский Ю.С., Румянцева Т.А., Чугай Г.Н. – Киев, 1991 г. - с. 48-49.
Методика основана на титровании водного раствора концентрата СОЖ соляной кислотой в присутствии смешанного индикатора.
весы лабораторные общего назначения по ГОСТ 24104-88 2-го класса точности;
колбы конические 250 мл со шлифом, ГОСТ 10394-72;
посуда мерная стеклянная ГОСТ 20292-74, пипетки мерные вместимостью 10 мл, бюретки с оливой вместимостью 50 мл;
посуда мерная стеклянная ГОСТ 1770-74, колбы мерные вместимостью 500,100 мл;
вода дистиллированная ГОСТ 6709-72;
кислота соляная по ГОСТ 3118-77, водный раствор 0,1н;
смешанный индикатор: метиловый красный (0,25%-ный в спирте) с метиленовым синим (0,1%-ный в спирте) в соотношении 1:1;
спирт этиловый синтетический по ГОСТ 18300-87;
рекомендуется применять автоматический титратор.
В мерную колбу на 500 мл берут навеску концентрата СОТС 50 г с точностью ±0,01 г, растворяют навеску в небольшом количестве воды и доводят до уровня водой, применяемой для разбавления концентратов СОТС на предприятии.
В мерные колбы вместимостью 100 мл отбирают 5, 10, 20, 25, 30, 35, 40 мл приготовленной эмульсии, что будет соответствовать эмульсиям с массовыми долями СОЖ 0,5%, 1,0%, 2,0%, 2,5%, 3,0%, 3,5%, 4,0%.
В колбы доливают до меток воду, применяемую для разбавления концентратов СОТС на предприятии.
Полученные эмульсии тщательно перемешивают и выдерживают 30 минут при комнатной температуре.
Титрование полученных эмульсий проводят следующим образом: 10 мл помещают в коническую колбу, добавляют 50 мл дистиллированной воды, перемешивают до однородности, добавляют 5-7 капель смешанного индикатора и титруют 0,1н раствором соляной кислоты до перехода зеленой окраски в серовато-розовую.
Калибровочный график строят, откладывая по оси ординат объем соляной кислоты, ушедший на титрование (мл), по оси абсцисс – концентрацию СОЖ (массовые доли).
10 мл эмульсии неизвестной концентрации помещают в коническую колбу, добавляют 50 мл дистиллированной воды, перемешивают до однородности, добавляют 5-7 капель смешанного индикатора и титруют 0,1н раствором соляной кислоты до перехода зеленой окраски в серовато-розовую.
Массовую долю определяют по калибровочному графику.
методика разработана на основе методики определения аминного числа, предложенной УкрНДИНП «МАСМА»;
для повышения точности определения калибровочный график «концентрация – объем соляной кислоты» рекомендуется строить для каждой партии СОЖ, поступившей на предприятие.
ПОЛУЧИТЬ КОНСУЛЬТАЦИЮ